用Fucci进行口腔上皮细胞系（Ca 9-22）的细胞周期观察
基于延时拍摄成像的细胞周期观察事例
Fucci（Fluorescent Ubiquitination-based Cell Cycle Indicator）是一种能够对细胞周期进程进行实时有效监控的荧光探针。下列视频就是利用黄金城的一体化荧光显微成像系统BZ-X800，对已导入Fucci的口腔上皮细胞系（Ca 9-22）进行拍摄后得到的视频。期间以30分钟为间隔，进行了120次、共计60小时的延时拍摄成像。
利用多点拍摄功能，以30分钟为间隔，对6孔培养板的各培养孔，进行单次3点，共计18点的连续拍摄。
视频来源：
新潟大学医学部
基础医学系 显微解剖学（解剖学第3讲座）
三上刚和 先生
细胞周期观察中的问题点
在用活细胞（Live cell）进行长时间延时拍摄成像的过程中，必须始终维持恒定的温度、CO2浓度和湿度。解决上述问题的简易方法，就是掐准拍摄时机，仅在拍摄时将标本从恒温箱中取出，进行拍摄。但是这种方法又✅会衍生出“难以🍸再现拍摄位置”、“移动标本会改变其状态，存在污染风险”、“每次拍摄时都要进行人工维护”等诸多问题。
- A
- 台面式恒温箱
- B
- 温度及CO2控制器
一体化荧光显微成像系统BZ-X800采用台面式小型♔恒温箱，能够在维持标本环境恒定的同时，进行指定次数的自动拍摄。还能෴借助多点多条件拍摄功能，在改变倍率、滤光片等拍摄条件的同时，进行多点拍摄，只需以简单操作进行延时拍摄成像，就能以超高的效率，加快推动实验进程。
如果引进一体化荧光显微成像系统BZ-X800
- 全电动控制，操作简单便捷。无需暗室，可以在台面上安装小型恒温箱，轻松实现活细胞成像。
- 利用由制冷相机和专用镜头构成的高灵敏度光学系统，能够在尽量减少细胞损伤的同时，获取高精细的荧光图像。
- 能够一次性对多个标本进行延时拍摄，便于开展相同条件下的比较检验。
什么是Fucci？
Fucci技术用发出红色荧光的mKO2（monomeric Kusabira-Orange2）荧光蛋白质，结合G1期（分裂结束后，细胞开始为DNA复制做准备的时期）增长量超大的Cdt1，再用发出绿色荧光的mAG（monomeric Azami-Green1）荧光蛋白质，与Geminin（在从DNA复制到细胞分裂前的S/G2/M期的增长量超大）相结合，就能实现细胞周期进程的可视化，对DNA复制及细胞分裂的情况进行实时观察。
自2008年开发以来，Fucci技术就在不断改良，陆续推出了对细胞核内及细胞整体进行Fucci信号标记的Fucci（N+C）；在荧光蛋白质中应用mCherry和mVenus，使G1期和S/G2/M期更易分离的Fucci2；还有追加细胞周期间期（G1、S、G2期）识别能力，借此辨♍识4种细胞周期的Fucci（CA）等等。如今，Fucci技术已经被广泛用于发生学、再生医学、癌肿瘤学等领域，研究与细胞周期息息相关的各类生命现象。
